DOSSIER TÉCNICO CANINO/FELINO
– RetroMAD1
Huan Ung
Introducción:
La plataforma tecnológica de RetroMAD1 fue desarrollada
originalmente en el 2007 por Defensia S/B antes de que Biovalence S/B entrara
en un acuerdo de desarrollo conjunto el 4 de Noviembre del 2011. RetroMAD1 es
una proteína antimicrobial quimérica de tamaño 41.2 kDA, la cual consta de 3
dominios proteínicos: Retrociclina-101, MAP30 y Dermaseptina 01, los cuales
están unidos por conectores. Sus propiedades antivirales de amplio espectro se
deben a sus dominios, que bloquean la entrada y fusión de los virus así como la
integración del ADN viral con el ADN del portador y el desplazamiento del virus
a nivel ribosómico.
Esta proteína desnuda de fusión es particularmente única, ya
que a pesar de ser una proteína se puede administrar oralmente y retiene la
mayor parte de su bioactividad luego de la ingestión; esto en contraposición a
la mayoría de las proteínas, que no pueden permanecer bioactivas luego de pasar
por el tracto gastrointestinal. Esta proteína también ha mostrado estabilidad
aún bajo condiciones extremas como temperaturas altas de hasta 70° C por 15 minutos sin por ello perder la bioactividad y proteólisis
con enzimas gástricas como pepsina al PH2, tripsina y quimotripsina al PH8. Los
dominios permanecen separados y activos, sin replegarse ni bloquearse
mutuamente.
La tecnología
RetroMAD1 ganó el Premio de Oro a la Innovación Farmacéutica en BioMalasia
2011. BioValence S/B también ha participado exhibiendo esta tecnología en
BioPharma Asia 2013 así como en la exhibición realizada en Singapur en el 2014.
Localmente, esta tecnología ha sido presentada en el 25avo. Congreso Anual de
la Asociación de Veterinarios de Malasia 2014, el cual tuvo lugar en el Lotus
Desaru Beach Resort, en Kota Tinggi, Johor.
El Departamento de
Servicios Veterinarios de Malasia (DVS por sus siglas en inglés) nos otorgó una
aprobación especial el 12 de Marzo del 2014 para realizar un estudio de campo a
gran escala centrado en un virus canino y seis virus felinos.
El virus canino
principal en el cual nos estamos enfocando es el Parvovirus Canino 2 o PVC-2
(n=143). Los ensayos clínicos han mostrado hasta el momento una tasa de
recuperación del 80% versus un promedio del 55% en los perros que sólo reciben
un tratamiento estándar para el PVC-2.
Los principales
virus felinos en los cuales nos enfocamos son: Virus de Inmunodeficiencia
Felina (VIF), Virus de Leucemia Felina (VLFe), Peritonitis Infecciosa Felina
(PIF), Calicivirus Felino (FCV) y Rinotraqueitis Viral Felina (RVF).
1.- Actividad Antiviral
TRADUCCIÓN DE FIGURA 1A EN ORDEN DE
LECTURA:
HIV → Entrada → Env: gp120 + gp41
Las
Theta-Defensinas bloquean a las glicoproteínas receptoras virales de entrada.
→ CD4 → Coreceptor – → Fusión → Núcleo Viral →Decapsidación
Péptidos
antimicrobiales catiónicos seleccionados bloquean la fusión viral.
→ssARN →Transcripción Reversa → dsADN →
ADN del portador
Proteína
inactivadora de ribosomas bloquea la actividad de la integrasa y su
desplazamiento.
→Desplazamiento → Integración →
Desplazamiento → Proteínas estructurales → Germinación → Maduración
proteolítica
Figura 1A: RetroMAD1 inhibiendo una
infección viral en diferentes fases del ciclo de replicación viral.
RetroMAD1 inhibe a los virus en 4
diferentes fases del ciclo de replicación viral:
·
Entrada
del virus: Las Theta-Defensinas (Retrociclina 101), dominio de RetroMAD1,
enlazan y bloquean a las glicoproteínas virales que intentan entrar a las
células.
·
Fusión
Viral: Las proteínas catiónicas antimicrobiales (CAP por sus siglas en inglés)
de la Dermaseptina 01, parte de RetroMAD1, evita la fusión y la decapsidación del
virus en las células del portador.
·
Integración
viral al ADN: La proteína MAP30 bloquea a las enzimas integrasa de tal forma
que los virus ARN -como los Retrovirus- no pueden integrarse en el genoma del
portador como un ADN proviral.
·
Bloqueo
de desplazamiento: La proteína inactivadora de ribosomas (RIP) también inhibe
el desplazamiento del mARN viral a nivel ribosomal, deteniendo el pre-
ensamblaje de proteínas virales.
Figura 1B: Estructura
en 3D de RetroMAD1 y sus sitios activos.
Estudios computacionales bioinformáticos se realizaron
combinando varios tipos de software bioinformático para construir la estructura
3D de RetroMAD1. (Figura 1B) Cada dominio proteico fue enlazado por conectores.
Los sitios activos de cada dominio se muestran en violeta.
·
Sitios
activos de Retrociclina 101: Cistina 31, 29, 27, 36, 38, 40.
·
Sitio
activo de MAP30: Arginina 217; Tirosina 126, 165; Ácido Glutámico 214.
·
Sitios
activos de Dermaseptina 01: Leucina 329; Lisina 330; Treonina 327; Alanina 323.
De este estudio podemos concluir que
los diferentes dominios no se replegan ni bloquean los sitios activos de
RetroMAD1.
Actividad Antiviral de Amplio Espectro
RetroMAD1 es una droga
de amplio espectro que ha mostrado resultados positivos y es efectiva contra
virus ADN y ARN en diferentes especies.
Nombre
de Virus ARN Tipo Portador Familia Género Estudio
Virus de Inmunideficiencia Felino (VIF) ssARN
Gato Retroviridae Lentivirus In Vivo
Virus de Leucemia Felina (VLFe) ssARN Gato Retroviridae Gammaretrovirus In Vivo
Calicivirus Felino (FCV) ssARN Gato Caliciviridae Vesivirus In Vivo
Coronavirus Felino ssARN Gato
Coronaviridae Alphacoronavirus In Vivo e
In
Vitro
Coronavirus Canino ssARN Perro Coronaviridae Alphacoronavirus In Vivo
Necrosis Nerviosa Viral (VNN o ssARN Peces
Nodaviridae Betanodavirus In Vivo
NNV)
Chikungunya ssARN Humanos
Togaviridae Alphavirus In Vitro
Fiebre del Dengue ssARN Humanos Flaviridae Flavivirus In Vitro
Nombre
de Virus DNA Tipo Portador Familia Género Estudio
Virus de Panleucopenia Felina (VPF) ssADN
Gato
Parvoviridae Parvovirus In Vivo
Rinotraqueitis Viral Felina (RVF) dsADN Gato Herpesviridae Vericellorirus In Vivo
Rotavirus Simio A
dsADN Monos
Reoviridae Rotavirus In Vivo
Parvovirus Canino 2 (PVC-2) ssADN Perros Parvoviridae Parvovirus In
Vivo
Herpes Simple 1 (HSV-1)
dsADN Humanos Herpesviridae Simplexvirus In Vitro
Herpes Simple 2 (HSV-2) dsADN Humanos Herpesviridae Simplexvirus In Vitro
Parvovirus Hepatopancreático(HPV) ssADN
Camarón Parvoviridae Parvovirus In Vivo
Síndrome de Mancha Blanca (VSMB) dsADN
Camarón Nirmaviridae Whispovirus In Vivo
Baculovirus Monodon (MBV) dsADN Camarón Baculoviridae Baculovirus In
Vivo
Herpesvirosis Koi (HVK) dsADN Peces Alloherpesviridae Cyprinvirus In Vivo
2. Citotoxicidad
TRADUCCIÓN DE FIGURA 2A
EN ORDEN DE LECTURA:
Concentración
Tiempo
72 horas
Viabilidad celular (%) (Línea vertical)
Concentración (µg/mL) (Pie de imagen)
Figura 2A: Prueba de
viabilidad celular en varias concentraciones de RetroMAD1 en un periodo de 72
horas.
En la prueba de citotoxicidad de RetroMAD1, un cultivo de células CRFK (Crandell-Rees de riñón de gato) fue expuesto a diferentes
concentraciones de RetroMAD1 en un periodo de 72 horas. Los resultados son como
se detallan en la Figura 2A: Las líneas celulares no mostraron señales de
muerte celular excepto a 100 µl/mL, donde la viabilidad
celular se reduce al 20%. La información de viabilidad celular muestra que la
droga es completamente segura hasta dosis de 80 µg/ml en un tiempo de
exposición de 72 horas.
3a. Estudio In Vitro
TRADUCCIÓN FIGURA 3Ag:
Actividad
Antiviral de RetroMAD1 contra el PIF vía tratamiento simultáneo (Título)
Reducción
del ARN Viral (%) – (Línea vertical)
Tiempo
(horas) – (Pie de imagen)
Figura 3Ag: Actividad antiviral de RetroMAD1
contra el PIF (Peritonitis Infecciosa Felina) en varios puntos de tiempo.
Los
resultados obtenidos en la Figura 3Ag sugieren
que RetroMAD1 muestra actividad inhibitoria contra el PIF vía tratamiento
simultáneo en dosis altas no tóxicas (MNTD por sus siglas en inglés) arrojando
un 72.33, 90.56 y 85.17% de inhibición en 24, 48 y 72 horas, respectivamente. Este
estudio muestra que RetroMAD1 es efectivo contra el PIF in vitro.
3b. Entrada de RetroMAD1 en las células
Proteína Recombinante
(etiquetada FITC) Núcleo
celular
Imagen combinada
Figura 3A: FITC
etiquetado a His-Tag en RetroMAD1 muestra que se congrega alrededor del núcleo
luego de entrar a la célula.
FITC = Isotiocianato de fluoresceína
DAPI = 4’, 6-diamidino-2-fenilindol
Los exámenes histológicos de
fluoresceína revelan que RetroMAD1 no solamente se transporta dentro del citoplasma celular
sino también a la periferia del núcleo celular, posiblemente a través del
retículo endoplasmático. Aún se especula si RetroMAD1 se transporta dentro del
núcleo de la célula o no. De todas formas, esto no compromete su actividad
antiviral.
4a. Estudios de
campo en perros
TRADUCCIÓN DE FIGURA
4A:
Enfermedad/Infección # de Muestras Tasa de
recuperación
sintomática
Virus Caninos Parvovirus Canino (PVC-2) 143 80.4
Coronavirus
Canino (CCV) 3
100.0
Figura 4A: Estudio a pequeña escala realizado durante ensayo
clínico de RetroMAD1 en enfermedades que
afectan animales pequeños.
TRADUCCIÓN DE FIGURA 4B:
Grupo A Grupo
B
9 días – 17% 8
días – 9%
8 días – 33% 7
días – 32%
5 días – 33% 6
días – 4%
4 días – 17% 5
días – 18%
4
días – 14%
3
días– 23%
Figura 4B: Gráfico
circular de la duración de la recuperación (en días) del Grupo A (tratamiento
convencional) y Grupo B (RetroMAD1 + tratamiento convencional).
En un ensayo clínico a gran escala con veterinarios malayos
registrados así como veterinarios filipinos, se realizó un breve estudio en
perros con resultados sorprendentes. (Figura
4A) RetroMAD1 se utilizó en el tratamiento del Parvovirus Canino 2
mostrando altos índices de recuperación (80.4%, n=143). Adicionalmente, en un
estudio comparativo de perros infectados con CPV-2 que fueron tratados
únicamente con tratamientos convencionales, los animales tuvieron un 55% de
supervivencia. Se observó un aumento en la tasa de recuperación de los perros
infectados, así como un tiempo de recuperación más corto, siendo la duración de
la recuperación en el Grupo A un promedio de 1.62 días menos que el Grupo B. (Figura 4B)
Resultados similarmente extraordinarios se lograron en un
estudio preliminar en donde RetroMAD1 se utilizó en el tratamiento del
Coronavirus Canino, con una alta tasa de recuperación (100%; n=3); sin embargo,
la muestra de estudio es pequeña.
En la actualidad se realizan más estudios con mayor número de
muestras.
4b. Estudio de campo
gatos
Traducción tabla 4Ag:
Enfermedad/Infección #de Muestras Tasa de recuperación
Sintomática (%)
Virus Felinos Virus de Inmunodeficiencia 25 76.0
Felino (VIF)
Virus de Leucemia
Felina(VLFe) 28 67.9
Virus de Panleucopenia 10 90.0
Felino (VPF)
Rinotraqueitis Viral Felina
(RVF) 6 83.3
Calicivirus Felino (FCV)
8 75.0
Peritonitis
Infecciosa Felina(PIF) 21 9.5
Tabla 4Ag: Estudio a
pequeña escala realizado durante ensayo clínico de RetroMAD1 en enfermedades
que afectan a animales pequeños.
En un ensayo clínico a pequeña escala con veterinarios
malayos registrados, gatos sintomáticos con Virus de Inmunodeficiencia Felina
(VIF) tuvieron una alta tasa de recuperación (76%; n=25) mientras que gatos
similares con Virus de Leucemia Felina (VLFe) tuvieron también recuperaciones
extraordinarias (67.9%; n=28). Otros estudios clínicos incluyeron al Virus de
Panleucopenia Felino (VPF) con una muy alta tasa de recuperación (90%; n=10).
Las infecciones análogas Rinotraqueitis Viral Felina (RVF) y Calicivirus Felino
(FCV) obtuvieron también notables tasas de recuperación (83.3%; n=6 y 75%; n=8,
respectivamente).
Un caso de VIF notable fue el del gato Orange, diagnosticado
en las últimas etapas de VIF durante el 2007. Este gato inició un régimen de tratamiento
con RetroMAD1. Orange logró una recuperación impresionante después de 4 meses
de tratamiento, actualmente se encuentra en condición normal y saludable.
5. Seguridad
farmacológica
18 ratas macho y 18 ratas hembra fueron colocadas al azar en
3 grupos (dosis alta, dosis baja y control), consistiendo cada uno de 6 ratas
macho y 6 ratas hembra. A dos grupos se les administró oralmente diferentes
dosis de RetroMAD1 en el periodo de un día. Cada grupo de investigación recibió
una dosis única de 20mg/kg 5 ml/kg B.W.
(dosis alta). Al grupo de control se le administró placebo oralmente (agua
destilada) 5ml/kg B.W.
Estas ratas fueron posteriormente sujetas a ayuno durante la
noche (se les permitió solamente tomar agua). Las ratas fueron alimentadas dos
horas antes de la administración de la dosis. Después de recibir la dosis, no
se les permitió comer o tomar agua por 3-4 horas. Las ratas fueron
continuamente monitoreadas en intervalos de 30 minutos, 2 horas, 3 horas, 24
horas y 48 horas para observar si existían signos de cambios de comportamiento
o el inicio de síntomas clínicos o toxicológicos.
La tasa de mortalidad se monitoreó por un periodo de 2
semanas. Las ratas fueron sujetas a ayuno y luego se les practicó la eutanasia
por sobredosis de xilazina y del anestésico ketamina. La toxicidad se estimó a
través del análisis bioquímico del suero, hematología e histología, de acuerdo
a los métodos estándar.
Resultados:
No hubo muertes ni se observaron signos clínicos de toxicidad
en ninguna de las ratas de los tres grupos durante el estudio.
TRADUCCIÓN PRIMERA
COLUMNA DE TABLA 5A:
Dosis
Machos
Control
Dosis baja
Dosis alta
Hembras
Control
Dosis baja
Dosis Alta
Tabla 5A: Perfil del hígado de las ratas que participaron en
el estudio farmacológico.
Evaluar el perfil del
hígado permite medir la bioquímica de la sangre producida en el hígado.
Basándonos en la lectura de la Tabla 5ª,
los grupos de ratas macho y ratas hembra que recibieron dosis altas y el grupo
de ratas macho que recibió dosis bajas no mostraron ningún cambio significativo
en su nivel de AST y ALT.
El grupo de ratas
hembra que recibió una dosis baja de RetroMAD1 tuvo a una sola rata con una
diferencia en el nivel de ALT cuando se la comparó con el grupo de control. La
evaluación de los elementos tóxicos se caracteriza por un aumento del ALT, en
cambio un bajo nivel de ALT sugiere que no han existido cambios en la función
del hígado. Esta lectura indica que no existen efectos tóxicos en el hígado de
las ratas de ambos sexos tras la administración oral de RetroMAD1.
TRADUCCIÓN PRIMERA
COLUMNA DE TABLA 5B:
Dosis
Machos
Control
Dosis baja
Dosis alta
Hembras
Control
Dosis baja
Dosis Alta
Tabla 5B: Perfil renal de ratas que participaron en el
estudio farmacológico.
El perfil renal se
realiza para observar si existen anormalidades renales. Los exámenes efectuados
para este propósito son de electrolitos, creatinina y nitrógeno ureico en la
sangre (BUN). Los niveles de creatinina y de nitrógeno ureico en la sangre de
ratas saludables es de aproximadamente 12-20 mg/dL (decilitros) y 0.3-0.4
mg/dL, respectivamente.
Ambos grupos no
mostraron ninguna diferencia significativa en la lectura de los niveles de
electrolitos y creatinina al ser comparados con el grupo de control. Las ratas
macho a las que se administró oralmente RetroMAD1 en dosis altas y bajas
mostraron una diferencia en los niveles BUN al compararlos con el grupo de
control. Los niveles bajos de BUN no son un indicativo de mal funcionamiento
renal. Más aún, los valores de los niveles de creatinina, comparados con el
grupo de control, sugieren que RetroMAD1 no produce anormalidades renales.
TRADUCCIÓN PRIMERA
COLUMNA DE TABLA 5C:
Dosis
Machos
Control
Dosis baja
Dosis alta
Hembras
Control
Dosis baja
Dosis Alta
Tabla 5C: Perfil lipídico de ratas que participaron en el
estudio farmacológico.
El perfil lipídico es
un panel de análisis de sangre que se realiza para detectar anormalidades en
los lípidos. El análisis de los triglicéridos, así como los resultados del LDL
y HDL, no fueron significativamente diferentes al grupo de control. La rata hembra a la cual se administró
oralmente RetroMAD1 mostró una diferencia en su nivel de triglicéridos.
Un aumento en el nivel
de triglicéridos sugiere riesgos para el corazón, al contrario de un bajo nivel
de triglicéridos. Esto indica que la administración oral de RetroMAD1 no
produce efectos tóxicos en los lípidos.
TRADUCCIÓN PRIMERA
COLUMNA DE TABLA 5D:
Dosis
Machos
Control
Dosis baja
Dosis alta
Hembras
Control
Dosis baja
Dosis Alta
Dosis
Machos
Control
Dosis baja
Dosis alta
Hembras
Control
Dosis baja
Dosis Alta
Tabla 5D: Hematología de ratas que participaron en el estudio
farmacológico.
La hematología es el
estudio de la morfología y fisiología de la sangre. Se realiza un control
hematológico para identificar anormalidades en la sangre. Las ratas macho y las
ratas hembra no mostraron una diferencia significativa con el grupo de control
dentro de los parámetros examinados. Sin embargo, en las ratas macho que
recibieron dosis orales bajas de RetroMAD1 y en las ratas hembra que recibieron
dosis orales bajas y altas de RetroMAD1, se detectó una baja en los niveles de
MCHC y un aumento en los niveles de WBC.
La Tabla 5D muestra un aumento en los
niveles de neutrófilos B y una disminución en los niveles de concentración
local de neutrófilos S. El contenido de los gránulos respectivos podría poseer
propiedades antimicrobianas o virales y se evaluaron en cuanto a su
participación en combatir la infección según los resultados del análisis. Esto
sugiere que una nutrición adecuada es esencial para estabilizar el sistema
inmunológico del cuerpo en la presencia de drogas.
6. La farmacocinética de RetroMAD1
TRADUCCIÓN
FIGURA 6A:
Farmacocinética de
RetroMAD1 en ratas. (Título)
Concentración de
RetroMAD1 (μg/ml) (Línea vertical)
Ø Suero sanguíneo
Ø
Médula
ósea
Ø
Estómago
Ø
Intestinos
Ø
Hígado
Ø
Riñones
Ø Control
Tiempo (hora) (Línea
en pie de imagen)
TRADUCCIÓN FIGURA 6B:
Concentración de
RetroMAD1 en el suero de ratones en diferentes puntos de tiempo. (Título)
Concentración de
RetroMAD1 (μg/ml) (Línea vertical)
Ø Ratones tratados
Ø Ratones en grupo de control
30 minutos – 1 hora –
2 horas – 4 horas – 8 horas – 12 horas – Día 2 – Día 3 – Día 4 – Día 5 – Día 6
– Día 7 – Día 10
Tiempo (línea en pie
de imagen)
Figura 6: A.) Farmacocinética de RetroMAD1 en diferentes
órganos y en diferentes puntos de tiempo. B.) Concentración de RetroMAD1 en el
suero de ratones en diferentes puntos de tiempo.
La farmacocinética se
realizó utilizando ratas de laboratorio. Estas ratas recibieron RetroMAD1 y
luego de 12 horas se les practicó la eutanasia. Sus órganos fueron extraídos y
cuantificados para el estudio de RetroMAD1. La figura 6A muestra que RetroMAD1
es absorbido por el tracto gastrointestinal 30 minutos después de su ingestión
(estómago e intestinos) y luego pasa al hígado a través del sistema portal
hepático llegando a un pico de una hora después de la ingestión.
Luego abandona el
hígado e ingresa al sistema circulatorio en donde la droga es detectada dos
horas luego de la ingestión tanto en el suero como en la médula ósea. Después
de 12 horas de circulación, la droga es expulsada del cuerpo a través de los
riñones.
Una investigación
adicional (Figura 6B) corrobora el resultado pues muestra que RetroMAD1 llega a
su pico en el suero de los ratones de 1 a 2 horas después de la ingestión.
Muestras de sangre obtenidas 30 minutos post alimentación por gavaje en los
días 2-10 evidencian una línea recta, lo cual indica que no existe
bioacumulación residual de dosis anteriores.
7. Estabilidad de RetroMAD1
Traducción de figura 7A:
Estabilidad de la
proteasa (Título)
Marcador - Tripsina PH8 – Control negativo – Tripsina
PH8 – Quimotripsina PH8 – Pepsina PH2
1 hora – 2 horas – 3
horas – 1 hora – 2 horas – 3 horas – 1 hora – 2 horas – 3 horas
Tiempo Pepsina (pH2) Tripsina (pH8) Quimotripsina
(pH8)
1 hora No digerida No digerida No digerida
2 horas No digerida No digerida No digerida
3 horas No digerida Parcialmente digerida Parcialmente digerida
Figura 7A: Estudio de exposición de RetroMAD1 contra varias
digestiones de proteasas.
En este estudio, se
expuso a RetroMAD1 a varias digestiones de proteasas hasta por 3 horas, luego
se realizó una Electroforesis en Gel SDS para determinar la integridad de la
proteína. Los resultados del gráfico muestra que RetroMAD1 no fue digerido por
la Pepsina al PH2 incluso luego de 3 horas y fue solo parcialmente digerido por
la Tripsina PH8 y la Quimotripsina PH8 luego de 3 horas. Estos resultados
muestran que RetroMAD1 se mantiene bioactivo incluso después de ser expuesto a
las enzimas digestivas del tracto gastrointestinal.
Termostabilidad
TRADUCCIÓN TABLA 7A:
Primer recuadro: Integridad de RetroMAD1
Tabla 7A: Termostabilidad de RetroMAD1 al ser expuesto a
varias temperaturas.
TRADUCCIÓN TABLA 7B:
Actividad Antiviral de
RetroMAD1 contra HSV-2 vía tratamiento simultáneo (MOI 0.1) – 24 h (Título)
Reducción de ADN Viral
(%) – (Línea vertical)
Ø Día 1
Ø
Día
7
Ø
Día
30
Ø Día 180
Temperatura (°C) (Línea pie de gráfico)
Figura 7B: Actividad antiviral de RetroMAD1 contra el HSV-2
luego de ser expuesto a varias temperaturas.
RetroMAD1 es
extremadamente estable en el calor. Se diseñó un experimento en el cual se
expuso RetroMAD1 a varias temperaturas (Tabla
7A) por 1, 7, 30 y 180 días. Luego, la droga pasa por una Electroforesis en
Gel SDS. Los resultados muestran que RetroMAD1 permanece intacto a través de la
observación de la banda de RetroMAD1 en el gel.
Para testear la
bioactividad de RetroMAD1, su efectividad contra el Virus del Herpes Simple 2
(HSV-2) fue examinada. De acuerdo a los resultados (Figura 7B) RetroMAD1 inhibe al HSV-2, el cual no logró infectar
las células del Vero (riñón de mono verde africano). Por lo tanto, podemos
llegar a la conclusión de que las diferentes temperaturas a las que RetroMAD1
fue expuesto no afectaron su bioactividad.
8. Polvo micronizado de RetroMAD1
Figura 8A: Microscopía electrónica de RetroMAD1 en polvo/mL
Se ha producido con
éxito una presentación de RetroMAD1 en polvo, utilizando el Secado de Fluido
Supercrítico (SCFD por sus siglas en inglés). Esto es para protocolos de
formulación futura utilizando tabletas. Los cristales cúbicos de RetroMAD1
miden aproximadamente 1 μg de diámetro.
TRADUCCIÓN
FIGURA 8B:
Actividad Antiviral de Polvo Micronizado de RetroMAD1
contra el HSV-2 vía tratamiento simultáneo (MOI 0.1) – (Título)
Reducción del ADN Viral (%) – (Línea vertical)
RetroMAD1 – 10 μg/mL RetroMAD1
– 15 μg/mL RetroMAD1
- 5 μg/mL
(en agua + NaOH) (en
agua + NaOH) (en
agua)
(Pie de imagen)
Figura 8B: Actividad Antiviral de RetroMAD1 en polvo en
varias concentraciones contra el HSV-2 en un tratamiento simultáneo.
La actividad antiviral
del polvo micronizado de RetroMAD1 fue evaluada en cuanto a su actividad
antiviral contra el HSV-2. El resultado obtenido, tal como sugiere la Figura 8B, sugiere que RetroMAD1 en
polvo exhibe actividad inhibitoria contra el HSV-2 con un 80-100% de inhibición.
Por lo tanto, el polvo
micronizado de RetroMAD1 puede ser introducido como una nueva ruta en la
administración de la droga en el futuro.
9. Instalaciones
TRADUCCIÓN DE PIES DE FOTO DE ÚLTIMA PÁGINA DE DOSSIERS EN
INGLÉS:
Ø Instalaciones de cGMP
Ø
Laboratorio de Investigación y
Desarrollo
Ø Laboratorio de procesos de optimización
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